כתם גראם או הידוע גם בשם צבע גראם הוא השם שניתן כדי סוג של מכתים ההפרש משמש בתחום בקטריולוגיה לדמיין את החיידקים, במיוחד דגימות קליניות. שמה של צבע זה נובע מהבקטריולוג הדני כריסטיאן גראם, שהיה אחראי על פיתוח הטכניקה בשנת 1884. מטרתו העיקרית של גראם הייתה להשיג בדיקה שתאפשר לו להבדיל קבוצות שונות של חיידקים על מנת לחקור אותן ולפרט אותן. סיווג שלהם. הניסויים של גראן התבררו כמוצלחים מאוד והוא יתבסס במהירות כאחת הטכניקות העיקריות משמש לחקר חיידקים, מאחר שהוא מאפשר לזהות אותם במהירות וביעילות בזיהום ולבחור את האנטיביוטיקה המתאימה ביותר לטיפול בזיהום האמור.
ההליך לביצוע מכתים הוא כדלקמן: הדבר הראשון הוא לקחת את דגימת החיידק שצביעה, ואז בעזרת ספוגית יש למרוח אותה על שקופית ולהשאיר אותה לייבוש בטמפרטורת החדר או, אם לא, להשתמש במצת, מקפידים במיוחד שלא לשרוף את החיידקים. לאחר מכן, המדגם צריך להיות קבוע בשקופית באמצעות מתנול למשך דקה בערך.
לאחר מכן הניח גוון של ג'נטיאן סגול על השקופית והניח לדקה אחת. חשוב לציין כי לצבע זה יש את היכולת להתגבר על כל סוג של דופן חיידקי ולכן ניתן לצבוע גם חיידקים גראם חיוביים ושליליים. לאחר מכן, יש לשטוף את הדגימה במים ואז להוסיף את לוגול, כך שהחומר האמור מכסה את כל הדגימה ולהמתין דקה. לוגול הוא תרכובת המורכבת ברובה מיוד, שבמקרה זה אחראי על קיבוע צבע הסגול הגנטי לדגימה.
לאחר השלבים שתוארו לעיל, יש לשטוף את השקף בתערובת של אלכוהול ואצטון לתקופה של כ- 30 יום. זהו שלב זה, כאשר כתם הגראם באמת מסתיים, זאת מכיוון שהתערובת של אלכוהול ואצטון היא אחראי על המסת מתחמי לוגול וסגול גנטיאן.
